Anal. Chem. | 基于马来酰亚胺衍生化实现内源小分子硫醇的快速定量分析

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分享一篇发表在Analytical Chemistry上的文章,题目为“Simultaneous Quantitation of Multiple Biological Thiols Using Reactive Ionization and Derivatization with Charged Mass Tags”,本文通讯作者为普渡大学的R. Graham Cooks教授,Cooks课题组致力于新型质谱技术的开发与应用。


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生命体中的各种硫醇(半胱氨酸、同型半胱氨酸、N-乙酰半胱氨酸和谷胱甘肽)是氧化还原平衡的关键参与者。因此,在临床上快速、准确地同时测量复杂生物流体中低浓度的硫醇含量对于了解患者体内氧化还原平衡的状态至关重要。在本文中,作者开发了一种简单快速的方法,可同时定量鉴别四种低分子量生物硫醇。
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本文使用带有固定电荷的马来酰亚胺衍生物作为衍生试剂,利用该基团与硫醇之间特异的反应性实现选择性衍生化。由此产生的产物可为每个硫醇提供特征 m/z 值信号,从而在一次质谱扫描中对多个硫醇进行相对定量与传统方法相比,上述流程具有样品制备时间短(<4分钟),分析时间短(<1 分钟)等优点,同时与独立的HPLC-MS金标准相比,仍保持着较高的精度和准确度。
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该方法适用于生物液体和组织样本,浓度范围从1 μM到10 mM。作者将上述方法成功应用于血清、小鼠血浆以及各种组织中,表明其在临床分析中具有广泛的应用前景。通过引入额外的还原步骤,作者成功测定了生物样本中的总胱氨酸含量,这证明了该方法能够跟踪胱氨酸及其氧化形式胱氨酸的氧化还原平衡。
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综上所述,本文基于携带固定电荷的马来酰亚胺衍生物,实现了对生物流体中内源小分子硫醇物种的快速、精确定量分析。
本文作者:TZS
责任编辑:FTY
文章链接:
https://pubs.acs.org/doi/10.1021/acs.analchem.4c03807
原文引用:DOI:10.1021/acs.analchem.4c03807




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