分享一篇最近发表在Nature Chemical Biology 上的文章，本文的题目是“Simultaneous multi-site editing of individual genomes using retron arrays”。本文的核心是作者们对之前开发的，反转录子单一位点编辑进行了改进，实现多位点同时编辑。本文的通讯作者是来自格莱斯顿数据科学与生物技术研究所的 Seth L. Shipman。

CRISPR 技术的发展极大地简化了构建敲除细胞的过程，并且，其强大之处还在于基因筛选（推荐这篇巧用 CRISPR 筛选解决问题的文章 doi: 10.1016/j.cell.2015.07.016，就可以了解什么样的生物学问题可以用 CRISPR 解决），以及从 CRISPR 技术衍生出来的基因编辑技术，比如 David Liu 开发的先导编辑 Prime Editing 可以做到单碱基上的精确编辑，还有各种剪辑编辑器 Base editor（只能将 A•T-to-G•C 或 C•G-to-T•A）。但是，目前基于 CRISPR 的编辑工具，无法做到一次性对基因组上的多个位点进行编辑。

除了 CRISPR，还有一种基于 Retron（译作“反转录子”）的编辑工具。Retron 是一个复合体，包含逆转录酶和一个非编码 RNA，该非编码 RNA 可以被分成两个区域：不能被逆转录的单链 RNA 区域（msr）和能够逆转录的单链 DNA 区域（msd）。其中，msd 区域被逆转录酶进行逆转录，产生大量的 donor DNA 片段，因此，可以把希望突变的部分设计在 msd 区域中（doi: 10.1073/pnas.2018181118）。

作者希望同时对多个位点进行编辑，他们进行了各种尝试，比如，将两个 donors 区域进行串联，放在图中蓝灰色 msd loop 中，但是，这一策略会导致越靠近msr 区域（图中橙红色）的 donors 被逆转录出来的效率越低。

作者又尝试让每一个 donor 都有自己的 msr loop，让 msr 单独表达。这样就解决了上述的问题，并且每个位点的精确编辑效率高达 10%。这一套系统目前在细菌中的效果很好，但在人的细胞中，多位点编辑效果并不如人意。

总之，本文发展了一种多位点同时编辑的Retron基因编辑工具，对于发展高效的基因编辑技术具有指导性意义。